概要 リコンビナントAAV(rAAV)の大規模精製方法に関する方法特許(Method Patent)です. 精製のためのスタート原材料は,rAAVを発現した細胞培養上清です. 精製ステップは,2段のクロマトグラフィーになっています.1段目には,高い塩濃度で吸着が可能な疎水クロマト,2段目には,低塩濃度で吸着が可能な陰イオンクロマトです. 以上のステップにより,目的遺伝子を包含していな不要なウイルス粒子を効率的に除去可能であるとしています. rAAV9の精製条件 当該特許は、現時点では「国際調査報告公開」です。 特徴的なのは、pH10.2を採用していることです。タンパク質にとってpH8以上のアルカリ性は、タンパク質に良い条件ではありません。それと、システイン残基のSS結合が緩むのが、pH8から上のpHです。それをpH10.2を使っているのは、それでしか精製・・・
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